T蛋白质的两个主要变异是CD3 +, CD8 + 。它们积极参与蛋白质介导的蛋白质毒素并释放毒素介导; CD3 + CD4 + T蛋白质,可以进一步分为带有不同促炎和抗炎功用的其他变异。 T蛋白质是免疫疗法的有期盼的靶标。 直接降低T蛋白质蛋白质毒活性的免疫疗法,现阶段在临床研究上使用癌症疗程。需要适用非危险性和无标签的新方法来全面比如说T蛋白质以指标免疫疗法。现阶段,T蛋白质变异和功用取决于表面蛋白(例如CD3,CD4,CD8和CD45RA)的表达和介导的产生。暂时性白光光学是一种分析免疫蛋白质行为的说服力的方法,因为它就其危险性的,依赖于内源性对比度,并包括极低时空高分辨率。因此,集体白光光学克服了基于标示出的方法的一次性适用上限,不备受混杂的标示出系统性因素(例如样品的浓度和标示出发挥作用发生变化)的影响,并尽可能对活T蛋白质顺利完成物理探测。暂时性白光光学还可以包括依赖于血容量(例如婴儿)的功用文档,这些文档没法顺利完成常规指标,并有助于对口服先入患者体液使用蛋白质免疫疗法的完全相同蛋白质顺利完成准确性控制。
方法: 从6个心理健康自已体液当中分离,为了确保暂时性白光光学和分类建模扩展到静态和诱导T蛋白质的混搭蛋白质,将来自一个供体的静态和诱导T蛋白质的一个集合(带有激诱导免疫反应的培养48小时)原属在独自并适用针对表面金属离子CD2,CD3和CD28的酪氨酸免疫反应在培养当中转录的T蛋白质显示出特定的诱导静止状态发挥作用暂时性白光寿命长方式也。 Logistic回归建模和随机雨林建模根据转录静止状态将T蛋白质分类。
结果:T蛋白质的NAD(P)H和FAD的集体白光寿命长光学与机器学习相结合,是使用对T蛋白质的诱导静止状态顺利完成无损无标签指标的准确方法。 NAD(P)H和FAD集体白光寿命长光学可包括有关蛋白质细胞内的极低生活空间,时间和功用文档,这使其成为指标T蛋白质的说服力方法。 暂时性白光寿命长光学可使用在临床研究前建模当中,在临床研究应用当中比如说体液T蛋白质,包括上限免疫反应标示出的小血样或在培养的T蛋白质。
原文客户端:Walsh, A.J., Mueller, K.P., Tweed, K. et al. Classification of T-cell activation via autofluorescence lifetime imaging. Nat Biomed Eng(2020).
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